s-180小鼠腹水瘤细胞培养说明书组成：组份
数目
细胞
 1 t-25瓶
细胞说明书
一份
细胞简介：生长特性：
贴壁生长
s-180小鼠腹水瘤细胞培养说明书
细胞来源：
从atcc/中科院/协和医院等地引进
培养条件：
培养基：1640 +10%fbs（推荐德国bi 04-002-1a
优等胎牛血清）
气相：空气95%，二氧化碳5%
温度：37℃
培养：
贴壁细胞1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行2-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6ml新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代；
2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，第一次传代比例为1:2。
3传代步骤：将0.25%含edta胰酶置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入1mlpbs，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为zui佳消化时间，记录zui佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入1ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。
二、悬浮细胞
1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒，然后置于无菌操作台，打开瓶口，轻轻吹打后，将其中的细胞悬液转移到离心管中，然后1200rpm离心3min，去上清；
2.将离心好的细胞转移至t-25瓶中，并加入5-6ml新鲜培养基，然后将其置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液（离心后去旧液，加入新鲜培养基）；
3.显微镜观察细胞数目比较多时，对其进行传代，第一次传代比例为1:2（离心后平均分成两瓶培养）。
细胞总数：
1~3*106
传代周期：
2-3天
传代比例：
1:2~1:4
换液频率：
2-3天
冻存液：
90%fbs+10%dmso

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